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基于便攜式熒光比色計的乳制品中三聚氰胺現場快速測定解決方案

更新時間:2025-08-20      點擊次數:181
一、檢測原理
本解決方案選用量子點作為熒光探針,量子點具有熒光量子產率高、穩定性好等優點,對三聚氰胺具有特異性識別作用。當量子點與三聚氰胺結合后,會發生熒光猝滅現象,且熒光猝滅程度與三聚氰胺的濃度在一定范圍內呈線性關系。便攜式熒光比色計可通過檢測量子點熒光強度的變化,進而實現對乳制品中三聚氰胺的定量測定。具體而言,在沒有三聚氰胺存在時,量子點發出較強的熒光;當三聚氰胺存在時,其與量子點表面的基團發生相互作用,導致量子點的熒光被猝滅,熒光強度隨三聚氰胺濃度的增加而逐漸降低。
二、樣品預處理
  1. 取 10mL 乳制品樣品于 50mL 離心管中。

  1. 加入 5mL 10% 的三氯醋酸溶液作為沉淀劑,充分振蕩 10 分鐘(振蕩速度為 200r/min),使蛋白質充分沉淀。

  1. 將離心管放入離心機中,以 4000r/min 的轉速離心 15 分鐘。

  1. 離心結束后,小心取出上清液,即為處理后的樣品,此步驟可有效去除樣品中的蛋白質等干擾物質。

三、檢測步驟
  1. 標準溶液配制:準確稱取一定量的三聚氰胺標準品,用超純水溶解并定容,配制一系列不同濃度的三聚氰胺標準溶液(0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L)。

  1. 熒光探針溶液配制:將量子點溶于磷酸鹽緩沖溶液(pH=7.0)中,配制濃度為 2μmol/L 的量子點熒光探針溶液。

  1. 反應體系構建:分別取 2mL 不同濃度的三聚氰胺標準溶液和處理后的樣品溶液于比色管中,各加入 2mL 量子點熒光探針溶液,充分混合均勻。

  1. 反應條件控制:將比色管置于 25℃恒溫水浴中反應 20 分鐘,控制反應體系的 pH 值為 7.0。

  1. 便攜式熒光比色計檢測:反應結束后,將比色管中的溶液倒入便攜式熒光比色計的比色皿中,設置激發波長為 365nm,發射波長為 520nm,測定溶液的熒光強度。

  1. 數據處理與結果分析:以三聚氰胺標準溶液的濃度為橫坐標,對應的熒光猝滅程度(空白熒光強度與樣品熒光強度的差值與空白熒光強度的比值)為縱坐標,繪制標準曲線。根據樣品溶液的熒光猝滅程度,從標準曲線上查得樣品中三聚氰胺的濃度。

四、性能評價
  1. 檢測限:通過對低濃度三聚氰胺標準溶液進行多次檢測,以 3 倍信噪比對應的濃度作為該方法的檢測限,經測定,本方法的檢測限可達 0.05mg/L,滿足乳制品中三聚氰胺的檢測要求。

  1. 精密度:對同一濃度的三聚氰胺標準溶液進行 6 次平行測定,計算相對標準偏差(RSD),結果顯示 RSD 小于 5%,表明該方法具有良好的精密度。

  1. 準確度:采用加標回收實驗,向已知濃度的乳制品樣品中加入不同量的三聚氰胺標準品,進行回收實驗,計算回收率,回收率在 85%-115% 之間,說明該方法具有較高的準確度。

  1. 特異性:選取乳制品中可能存在的干擾物質,如尿素、葡萄糖、乳糖等,進行特異性實驗,結果表明這些干擾物質對三聚氰胺的檢測無明顯影響,該方法具有良好的特異性。

綜上所述,本基于便攜式熒光比色計的乳制品中三聚氰胺現場快速測定解決方案操作簡便、快速、準確,適用于乳制品中三聚氰胺的現場快速檢測,可滿足食品安全監管和企業質量控制的需求。


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